第164章 实验正式开始(1/2)
实验正式开始
江河今日，提前下班。
医院这边的子弹，且让它先飞一会儿。
回学校推进科研项目去。
重症急性胰腺炎的论文已经发出，接下来的重头戏，是irna早筛。
这玩意做出来，是真正能撼动全世界的核武器，更是他前世今生执念的所在：
——攻克胰腺癌，从极早期的精准筛查开始。
返回南医大的公交车，江河在项目组的qq群里发了一条消息。
“所有人，一小时后，实验室开会。”
实验室。
江河进去的时候，众人都乖巧坐着。
“老大。”易向晚道，“你不是上班么？怎么这会儿就回来了？没有迎新聚餐什么的？”
“聚餐没有，倒是给我排了十五张重症床位。”
“啊，十五张？附一院现在把新人当牲口使啊？”
“没事，不用管医院那边，今天喊你们过来，是因为我们前期收集的几百份冻存血清样本已经全部到位了，irna早筛项目，从今天开始，正式进入湿实验阶段。”
此话一出，几个人的神色瞬间变得严肃。
跟江河混了这么久，他们很清楚这个项目的分量。
江河从包里拿出一沓打印好的a4纸，分发给众人。
“这是我这两天做出来的实验方案，大家先看一看。”
众人接过方案，低头翻阅。
江河：“这个项目的前景有多大，我以前跟你们说过，但我今天必须给你们打个预防针，这个过程，会极其枯燥，且充满挫折。”
“简单来说，我们要在血液里，找到与肿瘤相关的irna，目前，针对血清irna的商业化提取试剂盒还不够成熟，我们只能用最基础的方法来做。”
江河站起身，走到白板前，拿起马克笔画了一个简单的流程图。
“第一步，rna提取，这是最耗时的一步，也是你们未来几个月每天都要重复的工作。”
“我们手头有近六百份血清样本，我要求你们使用trizol ls试剂法来进行提取，因为血清中本身存在大量的rnase（核糖核酸酶），如果不迅速裂解，我们的目标rna就会降解得一干二净。”
“记住几个核心要点。”
“第一，绝对的无酶环境，我们的枪头、ep管必须是去rna酶处理过的，台面每天实验前用rnasezap喷洒后，再用depc水擦拭。”
“第二，加氯仿后的相分离，离心完，吸取上层水相的时候，手千万不要抖，哪怕少吸一点水相，也绝不能吸到中间的白色蛋白层，一旦污染，后面的数据全废。”
唐培认真地在方案上做着笔记：“老大，提取完之后呢？”
“提取完之后，是逆转录（rt）和实时荧光定量pcr（qpcr）。”
江河写下了一个数学公式。
“这是相对定量的计算公式，但因为irna太短了，只有大约22个核苷酸，传统的随机引物根本无法对其进行逆转录，所以，我们需要在逆转录之前，进行poly(a)加尾，或者使用特异性的茎环（ste-loop）引物。”
“现阶段，我们用最基础的加尾法，这些长周期、重复性的基础提取和建库工作，我今天全部分配下去，两人一组，轮班倒，一个月内，我要看到这六百份样本的cdna文库全部建立完毕，听明白了吗？”
顾亦舟严肃点头：“没问题老大，交给我们。”
江河看着手里的实验方案，突然想到副院长张随。
张随是美国约翰·霍普金斯大学医学院的博士后。
在08年，全球范围内在irna循环标志物领域走得最前沿的，除了哈佛的几家附属医院，就是约翰·霍普金斯的肿瘤学团队。
他们是江河这个项目在国际上最大的竞争对手。
想要在国际顶刊上抢发标准，光有数据有时候是不够的。
如果能借用张随在霍普金斯大学的人脉网络，比如让他作为通讯作者之一与国外同行进行学术沟通。
这篇文章在投向《柳叶刀·肿瘤学》或者《新英格兰医学杂志》时，面临的阻力会小得多。
不过，这些都是后话。
打铁还需自身硬，先把数据跑出来再说。
江河收回思绪。
“好了，戴上手套，我现在带你们做第一批样本的提取演示，所有人盯紧我的操作细节。”
接下来的两个小时，实验室里热火朝天。
江老师事无巨细，教学非常认真。
加入trizol ls，加入氯仿，4度离心机设定。
围观的几个人眼睛都不眨一下。
他们跟着江河做了几次科研了，举手投足间已经有了一丝老实验员的沉稳。
演示结束，江河将样本放进-80度超低温冰箱。
“就按这个标准来，今晚先做十个样本练手，明天下班我会过来查你们的纯度数据。”
“休息十分钟。”
休息时间。
程溪瑶从柜子里抱出几瓶矿泉水发给大家，然后快步走到江河身边，掏出笔记本。
“老大，跟你汇报一下我的进度。”
“宫颈糜烂那个？”
“嗯，推进得非常顺利！这段时间没课的时候，我跑了羊城大学城的三所高校，一共收回了四百份有效问卷，你猜结果怎么样？”
“很夸张？”
“对，简直是触目惊心，在这四百个女生里，有接近10的人曾经在校外的私立诊所被诊断为重度宫颈糜烂，而在这部分人里，有高达70的女生接受了抗生素输液、微波理疗甚至利普刀手术，她们花了几个月的生活费，去治一个根本不存在的病，很多人甚至因此产生了严重的心理负担，觉得自己……不干净。”
“下一步你打算怎么做？”江河问。
本章尚未完结,请点击下一页继续阅读---->>>